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    解讀文獻里的那些圖——流式細胞術
    來源： 時間：2025-01-14 09:28:36 瀏覽：5314次

    解讀文獻里的那些圖——流式細胞術

     

    流式細胞術（Flow Cytometry, FCM）是一種高度靈敏的分析技術，它利用激光照射單個細胞或微粒，通過檢測散射光和熒光信號來分析細胞的物理和化學特性；這項技術在生物學、醫(yī)學研究和臨床診斷中扮演著核心角色。

    一、基本原理

    流式細胞術的核心在于將細胞懸液通過一個非常細小的噴嘴，形成單細胞流，這些細胞逐一通過激光束。細胞與激光相互作用產(chǎn)生兩種散射光信號和多個熒光信號：

    前向散射光（FSC）：反映細胞的大小，因為大細胞會散射更多的光到前方。

    側向散射光（SSC）：體現(xiàn)細胞的內(nèi)部結構復雜度，如細胞內(nèi)顆粒的多少和密度。

    熒光信號：當細胞表面或內(nèi)部的特定分子被熒光標記的抗體結合后，被激發(fā)的熒光素發(fā)出特定波長的光，用于定量分析特定蛋白質(zhì)或核酸的存在和表達水平。

    二、圖像類型與解讀

    1. 直方圖

    單參數(shù)直方圖：展示單一參數(shù)（如FSC或SSC）的分布情況。橫坐標表示該參數(shù)的強度，縱坐標表示具有該強度的細胞數(shù)量。例如，通過FSC直方圖可以區(qū)分大小不同的細胞群體。

    2. 散點圖

    雙參數(shù)散點圖：同時展示兩個參數(shù)（通常是FSC與SSC，或兩個熒光信號）的分布，每個點代表一個細胞，點的密集程度表示該區(qū)域細胞數(shù)量。通過設置“門”（Gating），可以選取特定的細胞群體進行分析，比如區(qū)分淋巴細胞和粒細胞。

    3. 等高線圖與等密度圖

    這些圖型進一步可視化了散點圖中的數(shù)據(jù)密度，顏色或灰度的變化表示細胞密度的增加，有助于識別不同細胞群的重疊區(qū)域，尤其是在多參數(shù)分析中。

    三、應用實例

    免疫表型分析：通過標記特定的細胞表面抗原，如CD4+ T細胞，流式細胞術可以精確計數(shù)并分析這些細胞的比例。

    細胞周期分析：使用DNA染料（如PI）標記細胞，通過FSC和熒光信號分析，可以區(qū)分G1、S、G2/M期的細胞，評估細胞增殖狀態(tài)。

    凋亡檢測：利用標記活細胞和凋亡細胞的熒光探針，可以區(qū)分正常細胞、早期凋亡細胞和晚期凋亡/壞死細胞。

    四、數(shù)據(jù)分析與解釋

    門的設定：在分析過程中，研究者會根據(jù)直方圖或散點圖設定門，以圈定感興趣的細胞群體，這一步驟對于準確識別和量化特定細胞至關重要。

    多參數(shù)分析：現(xiàn)代流式細胞儀能夠同時分析多個熒光通道，提供細胞的多維度信息，這對于復雜細胞群體的解析尤為重要。

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    12條評論
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    全部 3小時前 四川
    文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具?，F(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字，很多小語種，有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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