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HE染色

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項(xiàng)目介紹

蘇木精 - 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，簡(jiǎn)稱HE染色法 ，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。 蘇木精 染液為堿性 ，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ;伊紅為 酸性染料 ，主要使細(xì)胞質(zhì)和 細(xì)胞外基質(zhì) 中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué)、 胚胎學(xué) 、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。

樣品要求

1、樣品可為新鮮組織、細(xì)胞爬片、4%多聚甲醛固定的組織/細(xì)胞、蠟塊或OCT包埋包埋劑包好的細(xì)胞/組織，以及已經(jīng)做好切片的組織。

2、樣品類型不一樣，價(jià)格有所差異。（需要進(jìn)行前處理，如需包埋、切片，則需收取前處理費(fèi)用）

項(xiàng)目案例

HE染色（兔心?。?/p>

HE染色(腎小球)

HE染色（心梗）

常見問題
1、切片在脫蠟后出現(xiàn)大量白色斑點(diǎn)

（1）烤（烘）片溫度太低，玻片在脫蠟前沒有充分烤（烘）干—先用無水乙醇去除玻片上的水分，然后重新用二甲苯進(jìn)行脫蠟處理。

（2）切片在二甲苯停留時(shí)間不足 或停留時(shí)間過久—切片需退回到二甲苯操作步驟，使其停留時(shí)間相對(duì)長(zhǎng)些，或更換二甲苯，進(jìn)行重新染色。

2、細(xì)胞核染色暗淡，即蘇木精染色太淡

（1）切片在蘇木精染色液停留時(shí)間太短

（2）蘇木精染色液過度氧化，失去染色能力，不能再繼續(xù)使用

（3）分化步驟時(shí)間過長(zhǎng)。如果是骨組織細(xì)胞核暗淡，則多數(shù)是由于脫鈣過度造成。

改善方法：切片需重新染色，如果組織在固定液固定時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞核染色能力將減弱，需增加其在蘇木精染色液的時(shí)間，或用一些方法增加組織的嗜堿性，以改善細(xì)胞核的著色。

3、細(xì)胞核過染，即蘇木精顏色過深，甚至蘇木精顏色的分布占據(jù)了細(xì)胞質(zhì)的位置

（1） 切片在蘇木精染色液停留時(shí)間過長(zhǎng)

（2） 切片太厚

（3） 分化步驟時(shí)間過短

改善方式：如果切片不是因?yàn)樘瘢瑢?duì)切片進(jìn)行重新染色，對(duì)于染色和分化時(shí)間做出適當(dāng)?shù)卣{(diào)整；如果確定是由于切片太厚導(dǎo)致細(xì)胞核過染，則需要重新切片。

4、細(xì)胞核呈紅、棕色改變

蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足—每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力，發(fā)現(xiàn)氧化過度及時(shí)更換。其次，可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等，在蘇木精染色后，給切片足夠的藍(lán)化時(shí)間。

HE染色

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